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人胱抑素C試劑盒正確操作!

更新時間:2021-10-08   點擊次數(shù):533次

人胱抑素C試劑盒正確操作!

產(chǎn)品名稱:人胱抑素C試劑盒

規(guī)格:48T/96T

儲存:2-8℃,避光保存

有效期:6個月

本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!

檢測原理:試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先 包被人胱抑素C(Cys-C)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、 標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB 顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn) 化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胱抑素C(Cys-C)呈正 相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品 濃度。

實驗步驟(僅供參考):

1. 使用前,將所有試劑充混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣的誤差。

2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。

3. 加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗T。蓋膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。

4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5. 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30鐘。

6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10鐘。避免光照。

8. 取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。

9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。


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